紫外分光光度計的工作原理基于朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律，即物質在一定濃度 的吸光度與它的吸收介質的厚度呈正比，其應用波長范圍為200～400nm的紫外光區、400～850nm的可見光區。主要由輻射源（光源）、色散系統、檢測系統、吸收池、數據處理機、自動記錄器及顯示器等部件組成。紫外分光光度計，就是根據物質的吸收光譜研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。紫外分光光度計可以在紫外可見光區任意選擇不同波長的光。物質的吸收光譜就是物質中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量，相應地發生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結果。由于各種物質具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空間結構，其吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質就有其特有的、固定的吸收光譜曲線，可根據吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質的含量。紫外分光光度計使用注意事項：（1）使用的吸收池必須潔凈，并注意配對使用。量瓶、移液管均應校正、洗凈后使用。（2）取吸收池時，手指應拿毛玻璃面的兩側，裝盛樣品以池體的4/5為度，使用揮發性溶液時應加蓋，透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈，檢視應無溶劑殘留。吸收池放入樣品室時應注意方向相同。用后用溶劑或水沖洗干凈，晾干防塵保存。（3）供試品溶液濃度除各該品種已有注明外，其吸收度以在0.3～0.7之間為宜。（4）測定時除另有規定外，應以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對照，采用1cm石英吸收池，在規定的吸收峰±2nm以內，測幾個點的吸收度或由儀器在規定的波長附近自動掃描測定，以核對供試品的吸收峰位置是否正確，并以吸收度zui大的波長作為測定波長，除另有規定外吸收度zui大波長應在該品種項下規定的測定波長±2nm以內。（5）供試品應取2份，如為對照品比較法，對照品一般也應取2份。平行操作，每份結果對平均值的偏差應在±0.5%以內。